个细胞接种于96孑l板,每孔200 trl。
细胞培养将细胞板放人孵箱中,在37摄氏度、百分之5,条件下培养24 小时,当细胞达到80~90汇合度时,弃去培养基。
接下来,就是细胞给药。
我们将将样品用d溶解后,按200、100、50、25、12.5克/毫升质量浓度加人细胞孔内,重复3批,并另加3孔作为阳性对照5氟尿嘧啶组。
3孔作为d对照组,每孔总体积100止,在酶联免疫检测仪上测定各孑l吸光度,计算细胞抑制率、
公式为抑制率1一加药细胞吸光度/对照细胞吸光度x100。再采用logit法计算ic。
然后是实验结果。
结构鉴定分别有化合物1白色无定形粉末甲醇。
化合物2白色粉末氯仿,化合物3:针状结晶甲醇。化合物4黄色粉末甲醇。化合物5黄色针晶甲醇化合物6黄色粉末甲醇,化合物7无色针状结晶氯仿,化合物8白色粉末甲醇。
我们这里能够看出,lc与谷甾醇对照品rf值及颜色一致,混合熔点不下降,故鉴定该化合物为p一谷甾醇。
tlc与胡萝卜苷对照品rf值及颜色一致,混合熔点不下降,故鉴定该化合物为胡萝卜苷。
还有就是抗肿瘤活性。
根据实验效果显示,山柰酚对kn45和sgc7901的抑制作用较强,ic50分别为48.87。
这个结果,远远高于阳性对照5氟尿嘧啶。
而山柰酚4—甲醚、乌骨藤苷h、i活性较强。
所以,我们能够清楚的得到了结果。
目前,关于乌骨藤提取物抗胃癌活性的报道主要集中在水提物和甾体化合。
而这一次的实验采用人胃癌细胞sgkn45,对该植物中分得的化合物进行体外抗肿瘤活性实验,发现黄酮类成分山柰酚对两者均表现出明显的抑制作用。
我这一次的实验表明,其能够通过作用于sgc7901的活性氧代谢途径来诱发细胞溶血,从而产生抗增殖活性。
当然,这一次尚无对kn45作用机制进行研究,故需要更深入的探索,以期为开发利用乌骨藤科学依据。
这项研究,单凭我一个人肯定是难以完成的,所以,我想要……”
还没有等钟医说完,甚至钟医都没有没有表达出什么想法的时候,一个声音急迫的表示了自己的意愿。
“我可以!我真的可以!钟医,我可以帮你,不,我可以给你打下手,进行这些实验标志物的进一步开发。”
杨光毫不犹豫地表达道。